Выделение и биологические характеристики стволовых клеток плаценты
Варьясова Александра Александровна /
Астрелина Татьяна Алексеевна /
Кобзева Ирина Владимировна /
Никитина Виктория Андреевна /
Карасёва Татьяна Васильевна /
Брумберг Валентин Андреевич /
Усупжанова Дарья Юрьевна /
Брунчуков Виталий Андреевич /
Расторгуева Анна Андреевна /
Леваков Сергей Александрович /
Самойлов Александр Сергеевич /
Цель. Выделение стволовых клеток (СК) из разных отделов плаценты и описание их биологических свойств.
Материалы и методы. Плаценту получали от рожениц в возрасте от 22 до 39 лет (средний возраст составил 29,0 ± 3,7 года) с одноплодной, физиологически протекавшей беременностью, закончившейся нормальными родами, при наличии письменного информированного согласия на 37–41-й неделе гестации после самостоятельного (n = 32) или оперативного (n = 2) родоразрешения. Выделяли Вартонов студень из пупочного канатика и плодную часть плаценты – хориальной пластины с ветвистым хорионом – и культивировали для получения мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Проводили морфологическую оценку клеточной культуры, дифференцировку, иммунологическую характеристику (CD34, CD45, CD90, CD105, CD73, HLA-DR (BD Biosciences и Becman Coulter, США)), оценку жизнеспособности с помощью красителя 7-ADD на проточном цитофлуориметре FACSCanto II (Becton Dickinson CA, США), прироста клеток, контроль стерильности, анализ полиморфизма STR (Short tandem repeat) локусов для идентификации, кариотипирование, криоконсервацию культур клеток.
Результаты. Первичные культуры клеток изолированы из хориальной пластины с разветвленным хорионом и Вартонова студня пупочного канатика в 100% случаев. МСК имели высокую пролиферативную активность и жизнеспособность (98,0 ± 1,2% 7-ADD) на протяжении всего периода культивирования. Кратность прироста МСК хориальной пластины на Р3, Р4 и Р5 была выше по сравнению с МСК Вартонова студня при культивировании, р ≤ 0,05. Иммунофенотип соответствовал требованиям Международной организации клеточной терапии: выявлена высокая экспрессия маркеров МСК (CD73, CD90, CD105), маркеры гемопоэтического и лимфоцитарного происхождения отсутствовали (CD34, CD45, HLA-DR). У всех полученных МСК была подтверждена способность клеток к дифференцировке в мезенхимальном направлении (хондроциты, остеоциты, адипоциты). В 95% случаев клетки имели плодное происхождение. Кариотип исследованных клеточных линий МСК был нормальным: 46, XX (женский) или 46, XY (мужской). Все клеточные культуры были протестированы, криоконсервированы и заложены в биобанк.
Заключение. Выделение и оценка биологических характеристик СК плаценты человека представляет собой большой интерес и является перспективным направлением в регенеративной медицине благодаря простоте забора плаценты, отсутствию этических проблем, возможности быстро получить и накопить необходимое количество клеточного мате-
риала со стабильным генотипом и заданными биологическим характеристиками.
Ключевые слова: мезенхимальные стволовые клетки, плацента, иммунофенотип, полиморфизма STR-локусов, кариотип
Для цитирования: Варьясова А.А., Астрелина Т.А., Кобзева И.В., Никитина В.А., Карасёва Т.В., Брумберг В.А., Усупжанова Д.Ю., Брунчуков В.А., Расторгуева А.А., Леваков С.А., Самойлов А.С. Выделение и биологические характеристики стволовых клеток плаценты. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2021; 20(5): 20–28. DOI: 10.20953/1726-1678-2021-5-20-28
For citation: Variasova A.A., Astrelina T.A., Kobzeva I.V., Nikitina V.A., Karaseva T.V., Brumberg V.A., Usupzhanova D.Yu., Brunchukov V.A., Rastorgueva A.A., Levakov S.A., Samoylov A.S. Isolation and biological characteristics of placental stem cells. Vopr. ginekol. akus. perinatol. (Gynecology, Obstetrics and Perinatology). 2021; 20(5): 20–28. (In Russian). DOI: 10.20953/1726-1678-2021-5-20-28
Ссылка на статью
Создание и 
