Разработка тест-системы для количественной детекции ДНК бактерий Escherichia coli, Streptococcus agalactiae, а также представителей рода Klebsiella методом ПЦР-РВ в экспресс-диагностике перинатальных инфекций

Автор / Мед учреждения

Н.Н.Володин / Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачёва, Москва, Российская Федерация

Л.А.Дегтярева / Российский государственный медицинский университет, Москва, Российская Федерация

А.Н.Шкопоров / Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова, Москва, Российская Федерация

Е.В. Хохлова / Российский государственный медицинский университет, Москва, Российская Федерация

Е.В.Кулагина / Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова, Москва, Российская Федерация

Б.А.Ефимов / Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова, Москва, Российская Федерация

Л.И.Кафарская / Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова, Москва, Российская Федерация
В работе описано создание диагностической тест-системы, основанной на принципе мультипраймерной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и предназначенной для одновременной детекции Escherichia coli, Streptococcus agalactiae и бактерий рода Klebsiella в различных типах клинического материала. В ходе проведенного исследования был осуществлен дизайн последовательностей праймеров и олигонуклеотидных зондов Taqman, а также подбор оптимальных условий проведения реакций амплификации. Был создан набор рекомбинантных плазмид для использования в качестве калибраторных ДНК и ДНК внутреннего контроля. Помимо этого был предложен оптимальный вариант методики выделения ДНК из клинического материала. Апробация разработанной тест-системы проводилась с использованием симулированных клинических образцов, а также клинических образцов, полученных от недоношенных новорожденных. Разработанная тест-система продемонстрировала высокую диагностическую чувствительность и специфичность и после проведения дополнительных испытаний может быть внедрена в клиническую практику.

Ключевые слова: полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, новорожденные, инфекционные болезни, диагностика.
Стоимость статьи: 100 ք
Получить доступ
Пароль:

Яндекс.Метрика