Клонирование и экспрессия генов биосинтеза сидерофора иерсиниахелина Yersinia pestis в клетках Escherichia coli

Настоящее исследование посвящено изучению гидроксаматного сидерофора иерсиниахелина (Ych) возбудителя чумы Yersinia pestis. Целью работы были создание рекомбинантного штамма кишечной палочки – продуцента Ych, анализ
экспрессии этого сидерофора в гетерологичном хозяине и оценка возможности использования рекомбинантного штамма для получения препарата Ych. В результате на основе плазмидного вектора сконструирована рекомбинантная плазмида, содержащая четыре гена биосинтеза Ych (аналоги ypo1529-1532) без собственного промотора, которые экспрессируются под контролем нерегулируемого железом векторного Plac промотора. Рекомбинантная плазмида, введенная в штамм E. coli, не синтезирующий собственные сидерофоры, способствует значительной экспрессии Ych. Сравнение свойств рекомбинантного и контрольного штамма, содержащего векторную плазмиду, позволило заключить, что экспрессия Ych в клетках кишечной палочки способствует защите бактерий от реактивных соединений кислорода. Анализ продукции Ych рекомбинантным штаммом выявил его перспективность для выделения Ych и его дальнейшей характеристики.

Ключевые словa: Yersinia pestis, Escherichia coli, сидерофор иерсиниахелин, рекомбинантная плазмида.

Для цитирования: Кузнецова Д.А., Подладчикова О.Н. Клонирование и экспрессия генов биосинтеза сидерофора иерсиниахелина Yersinia pestis в клетках Escherichia coli. Бактериология. 2018; 3(1): 36–44.
DOI: 10.20953/2500-1027-2018-1-36-44

Читать статью

Яндекс.Метрика